原代細(xì)胞的培養(yǎng)質(zhì)量至關(guān)重要

　　原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此，較為嚴(yán)格地說(shuō)是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上，通常把一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)，是細(xì)胞培養(yǎng)中很重要的，其質(zhì)量決定著傳代細(xì)胞的質(zhì)量，因此它的培養(yǎng)的質(zhì)量至關(guān)重要。
 

　　原代細(xì)胞是非常敏感的細(xì)胞，需要傳統(tǒng)培養(yǎng)基之外的額外營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。為了優(yōu)化存活和生長(zhǎng)，需要針對(duì)每種細(xì)胞類型選擇特定的培養(yǎng)基。例如，內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求與上皮細(xì)胞或神經(jīng)元有很大區(qū)別，因此需要特制的內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基。而傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)基依靠血清提供生長(zhǎng)因子、激素、脂質(zhì)和其他的未知組分，以支持細(xì)胞的生長(zhǎng)。但對(duì)于原代細(xì)胞，高血清水平可導(dǎo)致細(xì)胞分化，或促進(jìn)污染細(xì)胞如成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)。
 

　　此外，添加血清也受到成本上升及不同批次間差異性的困擾。配制具有很少或沒(méi)有血清的特殊培養(yǎng)基則可以避免這些問(wèn)題，并且更加有利于促進(jìn)特定類型細(xì)胞的生長(zhǎng)。此外，其他一些實(shí)踐，例如在更多的生理學(xué)相關(guān)底物上接種原代細(xì)胞而不是使用合成聚合物，可以顯著的促進(jìn)細(xì)胞貼壁、增殖及保持純度。
 

　　實(shí)驗(yàn)步驟：
 

　　1.試劑耗材準(zhǔn)備；
 

　　2.取新鮮動(dòng)物組織；
 

　　3.酶消化；
 

　　4.過(guò)濾網(wǎng)篩選、分離細(xì)胞；
 

　　5.加培養(yǎng)液，37℃、5%CO2培養(yǎng)；
 

　　6.傳代；
 

　　7.凍存；
 

　　8.復(fù)蘇。
 

　　應(yīng)用：
 

　　1.為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段；
 

　　2.為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件；
 

　　3.服務(wù)于臨床實(shí)踐，用于藥物篩選等。