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        熒光PCR試劑盒的檢測方法常見的局限性主要包括哪幾部分

        更新時間:2022-10-26點擊次數:1896
        DNA提取:對上述處理好的標本加入等體積核酸提取液(固體標本加入50μL核酸提取液),100℃恒溫處理10min,13,000rpm離心5min,取上清液轉移至新的1.5mL EP管,-20℃保存。
        檢測方法的局限性:
        a.樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;
        b.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現假陽性結果;
        c.陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;
        d.病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;
        e.不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果;
        f.試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果;
        g.本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。
        結果判斷:
        陽性:檢測通道Ct值≤35.0,且曲線有明顯的指數增長曲線。
        可疑:檢測通道Ct值>35.0,且出現典型擴增曲線的樣本建議重復試驗,重復試驗結果出現Ct值≤35.0和典型擴增曲線者為陽性,否則為陰性。
        陰性:樣本檢測結果無Ct值且無明顯的擴增曲線。
        質控標準:
        陰性質控品:無明顯擴增曲線或無Ct值顯示;
        陽性質控品:擴增曲線有明顯指數生長期,且Ct值≤32;以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。
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