異尖線蟲（Ani）熒光探針法PCR核酸檢測試劑盒采用 TaqMan 探針法實(shí)時熒光PCR技術(shù)，設(shè)計(jì)一對異尖線蟲特異性引物，結(jié)合一條特異性探針，用熒光PCR技術(shù)對異尖線蟲的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測。在反應(yīng)體系中含基因組模板的情況下，反應(yīng)得以進(jìn)行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應(yīng)通道的信號強(qiáng)度進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測和輸出，實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果的定性、定量分析。

異尖線蟲(Ani)熒光探針法PCR核酸檢測試劑盒說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：異尖線蟲(Ani)核酸擴(kuò)增檢測試劑盒(PCR 熒光探針法)

Name ：Ani nucleic acid amplification detection kit (PCR fluorescence probe method)

【包裝規(guī)格】48T/盒

【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于檢測水樣糞便等樣本中的異尖線蟲，用于異尖線蟲感染的輔助診斷，其檢測結(jié)果僅供參考。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒采用 TaqMan 探針法實(shí)時熒光 PCR 技術(shù)，設(shè)計(jì)一對異尖線蟲特異性引物，結(jié)合一條特異性探針，用熒光PCR 技術(shù)對異尖線蟲?的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測， 用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。

【試劑組成】

2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA 提取試劑盒（離心柱提取法），請嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

4. PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1 將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；

4.2 設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL；

5. 結(jié)果分析判定

【注意事項(xiàng)】

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6. 檢測方法的局限性

1）樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān)；

2）樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

3）陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會導(dǎo)致假陽性結(jié)果；

4）病原體在流行過程中基因突變、重組，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

5.1 結(jié)果分析條件設(shè)定

5.2 結(jié)果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。

可疑：檢測通道 Ct 值>35.0，且出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn)，重復(fù)試驗(yàn)

結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和典型擴(kuò)增曲線者為陽性，否則為陰性。

陰性：樣本檢測結(jié)果無 Ct 值且無明顯的擴(kuò)增曲線。

7. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：無明顯擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示；

陽性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無效。

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